11_离体小肠平滑肌的生理特性.ppt

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1、离休小肠平滑肌的生理特性 绍兴文理学院生命科学学院潘伟槐 实验目的 学习哺乳动物离体器官灌流的方法了解哺乳动物离体小肠段的一般特性 比较平滑肌与骨骼肌对不同刺激的敏感性差异 消化管 血管等均由平滑肌组成 平滑肌的特性与骨骼肌不同兴奋性较低 收缩缓慢 就是说收缩潜伏期 收缩期和舒张期所占时间比骨骼肌长得多富有伸展性 实验原理 自动节律性运动 离体后在适当的环境内 仍有良好的节律性运动 但很缓慢 并且不如心脏规则 这种自动节律性运动是起源于肌肉本身的一种自发的节律性去极化波 基本电节律 受神经 体液调节对化学 温度和机械牵张等刺激较为敏感 而对电刺激不敏感 这同它所处的环境相适应 将离开体器官 肠

2、段 置于一个合适的模拟内环境中 可在一定时间内保持其功能 如实验中用台氏液进行灌流 可研究肠段的一般生理特性 实验中观察温度和一些化学物质对肠平滑机活动的影响不同温度和缺氧的影响 平滑肌对温度和缺氧的刺激很敏感 迅速改变平滑肌收缩强度和节律BaCl2 Ba2 刺激肠壁的化学感受器 通过壁内神经丛短途反射 使收缩加强CaCl2 Ca2 浓度升高 使收缩加强 因为平滑肌动作电位发生 主要是由于Ca2 进入细胞内 而Na 作用非常有限 Ca2 在胞内浓度升高 激活平滑肌收缩系统 Ach 副交感神经节后纤维释放的递质 可与细胞膜上的M受体结合 影响内脏平滑肌的自动节律性和收缩性 Ach可使膜处于低极化

3、状态 当此低极化达到某一数值时 即诱发动作电位 并且还可使正在自动地活动的平滑肌的活动频率增加 改善细胞间的兴奋传递 使各肌细胞的收缩更加同步 这也造成收缩力量的增强 但这种作用可被阿托品阻断Adr 与肠壁 受体结合 表现为抑制作用 实验对象与器材 兔Pclab Ue 恒温平滑肌槽 张力换能器 烧杯 蛙心夹 电炉一个 温度计台氏液 10L Ach 0 01 Adr 0 01 BaCl2 CaCl2 阿托品 0 01 实验步骤 在恒温平滑肌槽保温水浴箱中加入适量的水 加热至37 恒温 在预热药槽内加入适量的台氏液 预热到37 按住恒温平滑肌槽右侧板的 加液 按钮 将预热药槽内的台氏液加入实验药筒

4、内 至约14ml处 制备肠段标本将动物执于手中 倒悬 用锤击其头延髓部 昏迷后立即开腹腔 取肠方法 先将肠管上相连的肠系膜沿肠缘剪去 再将拟取的肠管两端断 从十二指肠起约20 30cm 取出体外 将肠管剖开或不剖开 在台氏液内漂洗 先用37 充有空气的台氏液浸泡 待出现较大活力时 将其分成6cm左右肠段 将肠段装入实验药筒内 取一肠段 中间用线系好 A端 游离的二端剪齐 再用一已经系好线的蛙心夹夹住 B端 A端固定在通气片背侧的小钩上 将通气管放入实验药筒 并固定在管壁上 注意 在放入通气管时要避开实验药筒底部的温度传感器探头 开启气泵 给实验药筒内通内 调节通气量至气泡基本可数 按住 加液

5、按钮 将预热药槽内的台氏液加入实验药筒内 至全部浸末肠段 记住管壁上的刻度 下面每次实验时加入的台氏液量应相等 将换能器固定在恒温平滑肌槽的固定杆上 将肠段B端的线系在换能器的上 调节换能器的方向和臂长 使线垂直 并不与管壁接触 适度拉紧 记录观察实验前使肠段稳定约20分钟 开始下面的实验 先记录一段肠段运动曲线 停止供气1min 做好标记 下同 记录变化 有效应后 马上恢复供气 做好标记 下同 等恢复 放掉原有台氏液 加入25 台氏液 室温 实验药筒 记录变化 放掉原有台氏液 按住 加液 按钮 将预热药槽内的台氏液加入实验药筒内 冲洗一次 放掉原有台氏液 加入45 台氏液 同上 BaCl2的

6、作用 先描记一段肠段运动曲线 然后加入2 3滴BaCl2 或用1ml注射器吸取0 4ml 至实验药筒内 待观察到明显效果后 马上放出筒内的液体 按住 加液 按钮 将预热药槽内的台氏液加入实验药筒内 这样反复冲洗约3次待肠段恢复按同样的方法分别加CaCl2 Adr Ach观察记录生理效应先加入阿托品 观察变化 再加入同量Ach 观察变化 关键技术 PClab Ue的调节及时清洗 保持肠段活性 注意事项 保持预热药筒内始终有一定的台氏液每次加样后 待有明显效应 应马上换以新鲜的台氏液 并洗二到三次 待肠段运动基本恢复后再做下面的实验每次加样记录前都应先描记一段肠段的运动曲线通气速度不能过快 以免影响记录 思考题 比较单独加入Ach与先加阿托品再加Ach对肠段活动影响有何不同 原因是什么 说明什么问题 创新与探索 试自行设计实验 来探索不同pH值对肠平滑肌活动的影响